药厂设计之植物细胞培养生产天然药物的方法

文章来源 药厂设计公司 作者:制药厂房设计公司 时间:2020-02-07 16:48

下面笔者谈下药厂设计之植物细胞培养生产天然药物的方法。植物细胞培养是生产天然药物的一种重要方法,这些药物大多是植物细胞的次级代谢物,植物细胞培养生产次级代谢物的基本过程如下。

1、外植体的选择与处理

外植体是指从植株中取出,经过预处理后,用于植物组织、细胞培养的植物组织(包括根、茎、叶、芽、花、果实、种子等)的片断或小块。一般的处理方法是:将其切成0.51cm的片断或小块,用70%~75%的乙醇溶液或者5%的次氯酸钠、10%的漂白粉、0.1%的升汞溶液等进行消毒处理,再用无菌水充分漂洗,以除去残留的消毒剂。

2、植物细胞的获得

从外植体获得植物细胞的方法主要有三种,即外植体直接分离法、愈伤组织分离法和原生质体再生法。

3、植物细胞扩大培养

将上述方法获得的植物细胞在生长培养基中扩大培养,以获得足够数量的优质细胞。如果获得的细胞不够理想,还可以通过筛选、诱变、原生质体融合或基因重组等方法进行细胞改良,再进行细胞扩大培养。

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4、植物细胞悬浮培养或固定化培养

获得足够量植物细胞以后,就可以进行细胞悬浮培养。植物细胞悬浮培养是指植物细胞(主要是小细胞团)悬浮于液体培养基中,在人工控制的生物反应器中生长、繁殖和新陈代谢的过程。在生物反应器中进行大规模植物细胞悬浮培养的方式主要有分批培养、半连续培养、连续培养和两相培养等。也可进行固定化培养,即与固定化酶或固定化微生物细胞类似将植物细胞固定(或包埋)于海藻酸盐和卡拉胶等载体中。

5、目标次级代谢物的分离纯化

细胞培养完成后,如果目标次级代谢产物存在于细胞外,则可直接根据次级代谢物的分布情况,分别收集细胞或者培养液,在两相培养中则收集所使用的有机溶剂或者高分子聚合物等,再采用各种纯化分离技术进行分离、纯化,得到所需的各种次级代谢产物。如果次级代谢物存在于细胞内,则要经过细胞破碎,然后再进行提取和分离纯化。植物细胞次级代谢物的分离纯化方法,常用的有沉淀分离、膜分离和结晶等。

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